中文

English

采用TSKgel色谱测定牛乳中蛋白质——人生就是博-尊龙凯时助力研究

发布时间:2025-02-18   信息来源:尊龙凯时官方编辑

近日,农业农村部发布了五项与奶业相关的标准,其中包括NY/T4630—2025《牛乳及其制品中α-乳白蛋白和β-乳球蛋白的测定 高效液相色谱法》。该标准预计于2025年5月1日正式实施。随着人们生活水平的提升,奶制品在中国的消费量迅速增加。但在婴幼儿中,牛乳蛋白过敏症(cow's milk allergy,CMA)较为普遍,并且发生率逐年上升,主要是因婴幼儿对β-乳球蛋白和α-乳白蛋白产生过敏反应。因此,开发一种高特异性、高灵敏度、快速且准确的检测方法对于维护CMA患儿的健康至关重要。

采用TSKgel色谱测定牛乳中蛋白质——人生就是博-尊龙凯时助力研究

本研究根据上述标准,采用高性能尺寸排阻色谱柱TSKgel UP-SW3000(46mm ID×30cm,2μm)建立了牛乳及其制品中β-乳球蛋白和α-乳白蛋白的检测方法。样品预处理方面,对于高温杀菌牛乳和灭菌牛乳进行了平行实验。具体步骤为:称取试样125g(精确至0.1mg)于烧杯中,加入10mL水混匀后,用盐酸溶液调节pH至4.60±0.05,转移至25mL容量瓶中加水定容,混匀后转移至离心管,静置2小时,12000r/min离心10分钟。随后,准确移取1mL上清液至5mL容量瓶中,加入3mL盐酸胍缓冲溶液,并再加入50µLβ-巯基乙醇,用盐酸胍缓冲溶液定容,混匀后室温静置2小时,并摇匀过滤作为待测样品溶液。

在实验条件方面,采用的色谱柱为TSKgel UP-SW3000,流动相为盐酸胍缓冲溶液,流速为0.18mL/min,检测波长为UV@280nm,进样量为10µL。通过实验得到的结果显示,使用TSKgel UP-SW3000色谱柱能够有效分离β-乳球蛋白和α-乳白蛋白,峰分离度大于15。以β-乳球蛋白和α-乳白蛋白的浓度为横坐标,色谱峰面积为纵坐标,绘制的标准曲线相关系数均大于0.99,显示出该方法具有很高的可靠性和检测灵敏度。此外,方法的高效性使得检测过程更加省时,提升了操作便捷性。

综上所述,利用TSKgel UP-SW3000色谱柱成功建立了牛乳及其制品中β-乳球蛋白和α-乳白蛋白的检测方法,为相关领域的检测提供了科学依据和技术支持。值得一提的是,[强>人生就是博-尊龙凯时]一直致力于推动生物医疗领域的技术革新,助力更多家庭关注孩子的健康,守护婴幼儿的成长。